实验动物物理保定是动物实验的基础性核心操作，其规范程度直接决定实验数据的可靠性、实验动物的福利保障水平及操作人员的安全系数。本文梳理了物理保定的核心要求与实操准则，为相关实验操作提供具指导性的实践参考。

定义

物理保定指通过人工或机械方式限制动物部分或全部活动，以完成检查、样本采集、给药等实验的操作。

❉长时间保定的界定标准

不同物种对保定的耐受度存在显著差异，国内外很多机构及IACUC均采用“体位+时长”的双重界定标准，具体如下：

•         自然体位无固定：如猪使用吊具、无肢体固定的灵长类座椅等场景，持续时间≥30分钟即判定为长时间保定。

•         非自然体位或肢体固定：如啮齿类动物使用专用固定器、灵长类动物使用带头部固定的座椅等场景，持续时间≥15分钟即属于长时间保定。

•         特别注意：非人灵长类动物建议遵循相关福利规范中的特殊指引——若持续保定超过12小时，每日需为其提供至少1小时的自由活动时间；涉及长期保定的，必须提交充分的科学论证材料。

❉操作核心规范与实操案例

基本原则

遵循“必要最低”原则：优先采用皮下渗透泵等非限制性装置替代物理保定；保定时长严格以完成实验操作所需时间为限，严禁将物理保定作为常规管理手段。

实操案例

•啮齿类动物

小鼠尾静脉注射时使用专用固定架，仅暴露尾部，单次固定时间不超过15分钟；抓取时需轻捏颈背部皮肤，避免造成动物窒息或颈椎损伤。

•兔类

耳缘采血时采用盒式固定，严禁直接抓提双耳或腹部；手术操作时使用台式固定，四肢以棉绳活结绑定（便于紧急解绑），头部固定器需精准调整位置，避免压迫呼吸道影响呼吸。

•非人灵长类啮齿类动物

基础检查保定：使用配备可调节防滑坐垫、颈部缓冲垫及活动脚踏的专用座椅，先引导动物自主入座，再用两侧弹性绑带轻固定躯干（松紧度以能小幅活动为宜）；头部无固定时，单次保定时间不超过30分钟。

长期保定要求：长期保定前需完成系统性驯化适应，建议采用“时长逐步翻倍”的驯化逻辑：以 5 分钟为初始基础时长，若动物在该时长内无明显应激反应（如呼吸平稳、无持续挣扎、黏膜颜色正常），下次驯化将时长翻倍，后续每1-2 日根据动物适应状态重复翻倍操作，直至达到实验预期的长期保定时长，驯化全程需结合正向强化训练（如给予偏好食物奖励）以降低应激；持续保定超过12 小时的，每日需安排1 小时自由活动时间（活动区需配备攀爬架、咀嚼玩具等环境富集设施）；每日更换颈部、躯干接触部位的缓冲垫，由兽医每日检查有无压疮或皮肤损伤。

❉IACUC方案审查要点

1.  装置说明：明确保定装置的尺寸、材质及设计细节，如灵长类座椅需明确防滑垫规格、颈部缓冲装置的材质及防护原理等，确保装置具备防压疮等福利保障设计。

2.  必要性论证：对比分析替代方案的可行性，如连续采血实验需详细说明为何不采用植入式导管等创伤更小的方式，仅能采用物理保定的科学依据。

3.  时长与频率：明确单次保定时长及每日保定频率，如大鼠血压监测需标注每次固定不超过20分钟，每日保定不超过2次。

4. 训练方案：非人灵长类动物需提前2周开展正向强化训练，每日适应装置5-10分钟，训练过程中不适应的个体需剔除实验。

5. 监测计划：制定实时监测方案，每5分钟观察1次动物状态，记录呼吸频率、肢体活动等指标；啮齿类动物需重点关注尾部血液循环情况，避免缺血损伤。

6. 终止标准：明确保定终止的具体判定指标，当动物出现呼吸急促、黏膜发绀或挣扎加剧等异常情况时立即停止保定，若已造成损伤需第一时间由兽医介入处理。

7. 灵长类特殊条款：长期保定方案需额外提交环境富集计划，明确提供玩具、社交机会等促进动物心理健康的具体措施。

❉伦理底线与监督要求

保定操作的伦理核心是保障动物“五项自由”（饮食自由、居住自由、健康自由、行为自由、无恐惧痛苦自由），这是所有操作的不可突破的底线。对于违规操作，国内外很多机构均设立严厉处罚机制，包括暂停实验人员资质、撤销项目经费、取消机构实验动物使用资质等，以刚性约束确保规范落地。

小结

实验动物是科研创新的重要支撑，其福利保障水平直接反映科研工作的人文素养与学术诚信。只有实现规范操作与伦理关怀的深度融合，才能兼顾科研数据准确性、人员操作安全性与动物福利保障，推动动物实验研究在合规、伦理的轨道上实现可持续发展。